熒光檢查能查出來什么,熒光檢查注意點

，一定要及時固定和適當保存。

3

、血清封閉：為防止內(nèi)源性非特異性蛋白抗原的結(jié)合，需要在一抗孵育前先用血清（與二抗來源一致）封閉，減弱背景著色。血清封閉的時間是可以調(diào)整的，一般?10-30?min。

4

、一抗孵育條件：在免疫組化反應(yīng)中最重要，包括孵育時間和抗體濃度。一抗孵育溫度有幾種：4℃?、室溫、37℃?，其中?4℃?效果最佳；孵育時間：這與溫度、抗體濃度有關(guān)，一般?37℃?1-2?h，而?4℃?過宿和從冰箱拿出后?37℃?復溫?45?min。具體條件還要摸索。

5

、二抗孵育條件：二抗一般室溫或?37℃?立即觀察，若將標本放在聚乙烯塑料袋中?4℃?30?min-1h，具體時間需要摸索，而濃度一般有工作液，若是濃縮液還要摸索濃度，切記要避光反應(yīng)。但在免疫熒光中我們一般先把二抗?jié)舛群头跤龝r間先定下，然后去摸索一抗?jié)舛群头跤龝r間。最后，熒光素標記的二抗隨著保存時間的延長，可能后有大量的游離熒光素殘留，需要注意配制時小包裝和并進行適當?shù)碾x心。

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、復染：目的是形成細胞輪廓，從而更好地對目標蛋白進行定位。一般常用?DAPI?復染