,但現(xiàn)在也可以使用亮視野顯微鏡,隨意檢查10個視野
,計算活動精子的百分率
。在精子計數(shù)少于40~60×106/ml的樣本中,可以計算活動與不活動的確切精子數(shù)
。密度較高的樣本最容易觀測其活率和活力
,但也有學(xué)者認(rèn)為要稀釋樣本才能觀測,而有一定技術(shù)經(jīng)驗的人員觀測的結(jié)果基本是一致的
。精子的前向運(yùn)動是其質(zhì)量評估的關(guān)鍵
。精子活力分級如下:0級,表示無活力
;1級
,表示緩慢或沒有前向運(yùn)動;2級
,表示慢速前向運(yùn)動
;3級,表示精子中等速度的直線運(yùn)動
;4級
,表示精子高速直線運(yùn)動。在精液收集后反復(fù)測定其活力是無意義的
,而且不是一項生理性測定
。因為精子只在陰道穹窿沉著幾分鐘,便離開精液進(jìn)入宮頸粘液
。假如延長禁欲期
,精子的活力可能下降。
經(jīng)常性的精子凝集是不正常的
,可能提示抗精子抗體的存在
。自身免疫性不育占不育癥的3%~7%,也有報告占10%~20%
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?梢酝ㄟ^精子凝集試驗
,精子制動試驗,間接免疫熒光法
,酶聯(lián)免疫吸附試驗和測量活動精子表面的免疫球蛋白法來測定精子凝集抗體和精子制動抗體的存在
。在觀測中要注意區(qū)分出現(xiàn)的其它細(xì)胞類型。在玻片上濕的
、未染色的精液樣本中
,白細(xì)胞和未發(fā)育成熟的生精細(xì)胞在外形上都是圓形的。計算每高倍視野下這些白細(xì)胞的數(shù)目
,是考慮到生育力可能與精液中的白細(xì)胞密度相關(guān)
,出現(xiàn)大量的白細(xì)胞則要考慮感染和炎癥。未成熟的生精細(xì)胞密度與精子密度是相稱的
,盡管許多精液質(zhì)量較差的男性比可生育男性有更高的未成熟生精細(xì)胞的百分率
。但病人與病人之間也不盡相同,其意義不明確
。死精癥歸諸于無活力精子
,但這個術(shù)語是不嚴(yán)謹(jǐn)?shù)模谠S多死精癥病例中
,鞭毛軸絲的超微結(jié)構(gòu)有缺陷
,但這些精子是活的,只是沒有活力
,而且這些精子的外觀形態(tài)正常
。
五、精子形態(tài)
精子的形態(tài)學(xué)檢查對精母細(xì)胞的質(zhì)量和生育力是一個敏感的指標(biāo)
。 一些形態(tài)粗大的畸形精子在未染色的精液中通過亮視野顯微鏡檢查就能明確
,但此項檢查不敏感。隨著相差顯微鏡的使用
,通過載玻片上濕的精液樣本就可以獲得更細(xì)致的形態(tài)學(xué)檢查
。但是,最準(zhǔn)確的檢查需要樣本染色
。滴一滴精液在載玻片上
,用另一載玻片推片,待空氣干燥
,如果使用細(xì)胞固定液噴霧劑
,如巴帕尼克拉烏染劑(PAP)涂片的使用,有較好的形態(tài)保護(hù)作用
。樣本可用常規(guī)的PAP染色
。 蘇木精染色是一項更快的染色技術(shù),可以顯示細(xì)胞結(jié)構(gòu)
,但不是非常清楚
。最近,已經(jīng)開始使用預(yù)先染色的載玻片
,可以很好地顯示形態(tài)結(jié)構(gòu)
。在這種載玻片上直接放5~10μl精液,蓋上蓋玻片
,幾分鐘后精子會被染色
,并可以觀察其微觀變化。在1 000倍的油鏡下檢查100個精子
, 會發(fā)現(xiàn)很多精子形態(tài)不一致
。精子形態(tài)有70種以上變異,而實際分類是將精子分成頭正常型(卵圓形頭)
,不定型(不規(guī)則頭)
,頭逐漸變細(xì)型,大頭型
,小頭型和未成熟型(發(fā)育未全的)
。正常的人類精子頭部長3~5μm,寬2~3μm
, 未成熟的精子內(nèi)容物保留有圍繞補(bǔ)體中段的細(xì)胞漿小滴
。比較各樣本的精子形態(tài),個別病人的樣本中存在值得注意的一致性
。在感染
、發(fā)熱、放射或精索靜脈曲張等因素導(dǎo)致睪丸應(yīng)激狀態(tài)下
,在樣本中有超過2%~3%的未成熟精子存在
。這些細(xì)胞會在疾病開始的2~3周內(nèi)的射精精液中出現(xiàn)。頭不定型精子和頭逐漸變細(xì)型精子一般會伴隨著精液中不成熟精子比例的升高而升高
。在上述分類方法中還存在著許多變異
, 在正常標(biāo)本中, 包括有60%或更多的正常精子
,<3%的未成熟精子
。嚴(yán)格的正常形態(tài)標(biāo)準(zhǔn)提示在正常樣本中,正常的精子<60%
。
六
、其它精液參數(shù)
精液的pH值變化為7.05~7.80。精囊分泌物的pH值>7
,而前列腺分泌物的pH值常常<7
。所以,精囊缺如或功能不全的病人的精液
,其pH值較低
。而對這種精囊缺如或功能不全的病例
,通過對精液量的測定和經(jīng)直腸超聲檢查,能更容易和更精確地診斷
。
精囊依賴于雄激素而產(chǎn)生果糖
。正常精液中果糖濃度是6.59~24.72mmol/L,在精囊炎癥的情況下
,會造成精囊功能不全
。雄激素缺乏、射精管部分梗阻或不完全射精
,其精液中果糖濃度在6.59mmol/L以下
。在精囊缺如的情況下,精液中的果糖經(jīng)常缺乏
。人類精漿中的果糖可以用一種試劑來測定
,這種試劑是用50mg間苯二酚粉末和33ml濃鹽酸,再用蒸餾水稀釋至100ml 所組成
。精液和試劑按1∶10混合并煮沸
。假如果糖存在,煮沸60s后會變成桔紅色
。精囊梗阻或先天性精囊缺如的病人
,試驗為陰性,而且精液量很少和不凝固
?div id="jfovm50" class="index-wrap">;颊咄橛须p側(cè)輸精管缺如。精液其它成分
,如枸櫞酸
、磷酸酯合成酶、精胺
、氨基轉(zhuǎn)移酶
、鋅、鎂和其它離子還沒有發(fā)現(xiàn)其真正的臨床意義
。
七
、正常值
病人和醫(yī)生經(jīng)常無法分清正常生育者平均精子密度和其最低限度。在有生育力的人口中
,有意義的精子密度在7~8×107/ml
,盡管其反映了有生育力人口中精子密度的意義,但并不意味著獲得了最低限度精子密度的概念
。對不育者的統(tǒng)計表明
,隨著精子質(zhì)量下降,懷孕的機(jī)會也下降
。Collins等 (1983) 發(fā)現(xiàn)在一組男性因素的不育人群中
,不進(jìn)行治療的懷孕率有35%
。Glass等 (1979)報告了16對男性因素不育的夫婦中懷孕率有25%。Smith等(1977)報告了丈夫精子密度小于1.25×107/ml
,人群中懷孕率25%
,而精子密度在1.25×107/ml至2.5×107/ml人群中懷孕率達(dá)44%。其他研究者也發(fā)現(xiàn)了近似的結(jié)果
。研究發(fā)現(xiàn)在近幾十年中,人類精子質(zhì)量有下降趨勢
。
人們必須把亞生育和不育區(qū)分開來
。每個實驗室要確定自己的標(biāo)準(zhǔn)值,大部分學(xué)者同意如下標(biāo)準(zhǔn):精液量1.5~5.0ml
,精子密度5~6×107/ml
,精子活率≥50%,精子活力的前向運(yùn)動大于2級
,精子正常形態(tài)≥50%
。
另外,較小的凝集和粘稠度也許是正常的
。綜上所述
,只是對精液參數(shù)的評價基礎(chǔ),而不是明確的可生育診斷標(biāo)準(zhǔn)
。盡管精液中有數(shù)億精子
,但大多數(shù)體外授精研究證明,可能只有5~50萬個精子會使卵子受精
。
對將進(jìn)行子宮切除婦女的臨床研究證明
,陰道內(nèi)的精子中每5 000個只有一個到達(dá)宮頸粘液,每14×106精子中只有一個到達(dá)輸卵管
。此外
,要認(rèn)識到人們需要的是自然妊娠,而不需要應(yīng)用可以產(chǎn)生最適度精子密度的輔助生殖技術(shù)來妊娠
。
實驗證明
,少精癥病人與精子密度正常的人比較,即使有活力的精子數(shù)量相同
,使卵子受精的成功率前者仍低于后者
。所以,從體外授精來看
,用標(biāo)準(zhǔn)精液參數(shù)來衡量個體精子的生育潛能是不合適的
,少精癥病人精子在顯微結(jié)構(gòu)上也可能存在異常。
精液分析是一個耗時間的檢測
,依靠人的主觀判斷
,因此
,需要訓(xùn)練有素的觀察者。為了提高檢測速度和客觀性
,已開始應(yīng)用計算機(jī)
。出現(xiàn)的幾種經(jīng)濟(jì)型計算機(jī)系統(tǒng),包括慢細(xì)胞系統(tǒng)
,Hamilton-Thorn活力分析儀
,TS 1500精子運(yùn)動分析系統(tǒng)和精子運(yùn)動徑跡分析儀。在這些系統(tǒng)中
,來自顯微鏡的圖像被數(shù)字化
,并被記錄到錄像帶上。電腦用專門的程序來分析數(shù)字圖像
,通過特殊比較來明確精子
。這些特征包括與背景相比較物體的光學(xué)對比,參數(shù)測量
,鞭毛運(yùn)動分析
,運(yùn)動物體的形態(tài)和發(fā)光度。測定每個視野方框中精子位置和從一個方框移動到下一個方框的位置改變的速度
。然而
,這些系統(tǒng)并沒有達(dá)到人們期待的簡單、快速和精確分析的地步
。Vantman等的一項研究表明
,精子數(shù)在每高倍視野11~60個的情況下,精子密度大約被高估30%
,最重要的是
,在無精癥標(biāo)本中,精子密度有3.6×106/ml
。在其它系統(tǒng)中也發(fā)現(xiàn)了同樣的問題
。
計算機(jī)系統(tǒng)能夠檢測手工不能測定的參數(shù)。曲線速度是指單個精子在單位時間內(nèi)
,兩個連續(xù)位置間運(yùn)動的平均距離
。直線速度是指精子前向運(yùn)動的速度,這是一項前向運(yùn)動的檢測
。直線率是通過直線速度和曲線速度相除來測定的
。其它的檢測還包括精子頭部的側(cè)向位移,鞭毛運(yùn)動頻率和環(huán)狀運(yùn)動分析
。精子過強(qiáng)運(yùn)動是精子獲能后的大幅度運(yùn)動狀態(tài),精子頭和尾運(yùn)動幅度很大
,但前向運(yùn)動很慢或沒有。已發(fā)現(xiàn)在獲能前,大約0.4%精子有一個過強(qiáng)運(yùn)動形式
。隨著獲能
,可生育樣本中22%的精子有過強(qiáng)運(yùn)動, 而在少精癥病人中只有8.5%
。還沒有足夠數(shù)據(jù)證明在這方面的精液分析中
,電腦分析比手工分析更先進(jìn)。雖然電腦系統(tǒng)中加入了精子形態(tài)分析
,但還沒有文獻(xiàn)來評估其有效性和有用性
。計算機(jī)精子分析系統(tǒng)在研究工作中證明是有用的,但在臨床工作中的價值還未被證明
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!?
參考文獻(xiàn):請到泌尿外科就診,有分常規(guī)及電子顯微鏡檢查
;分別10元及100元
精子在女子體內(nèi)能存活多長時間