人參總皂苷可誘導干細胞分化為心肌樣細胞

日前，廣州中醫(yī)藥大學的汪朝暉和該校第一附屬醫(yī)院的冼紹祥、楊忠奇等研究人員在承擔的一項國家自然科學基金資助項目中發(fā)現，人參總皂苷(GS)可體外誘導骨髓間充質干細胞（MSCs）分化為心肌樣細胞，為將中藥應用于細胞移植領域提供了實驗依據。

隨著心肌梗死發(fā)生率逐年增高，如何替代壞死心肌，改善肌原性心衰，是當今醫(yī)學研究的熱點。目前，為使心梗后心肌修復成為可能，國內外學者多采用5-氮胞苷（5-aza）來誘導MSCs分化成心肌細胞。人參具有保護心肌的作用。在本實驗中，研究人員采用人參總皂苷進行誘導MSCs向心肌樣細胞分化的研究，以揭示其治療心肌梗死的細胞生物學機制。

研究人員取成年大鼠骨髓細胞，采用密度梯度分離法與貼壁法結合獲取MSCs，進行原代培養(yǎng)和克隆培養(yǎng)；采用流式細胞儀檢測細胞表面抗原CD34和CD44以鑒定該法所獲細胞是否為MSCs；對傳至第8代的MSCs進行分組誘導，分別為Gs組(終末濃度為250毫克/升)、5-aza組(終束濃度為10微摩爾/升)、GS+5-aza組(終末濃度分別為250毫克/升、10微摩爾/升)，每組再分3個亞組，分別對MSCs進行24、48、72小時誘導，并設空白對照組；采用共聚焦熒光顯微鏡觀察細胞數及陽性細胞數，計算心肌樣細胞轉化率；采用免疫組化法檢測分化的心肌樣細胞的特異性蛋白結蛋白和肌鈣蛋白，采用逆轉錄聚舍酶鏈反應(RT-PCR)檢測誘導前后心肌細胞特征性基因α-心肌肌球蛋白重鏈和β-心肌肌球蛋白重鏈的表達。

結果顯示，分離培養(yǎng)后的細胞生長密集，形態(tài)呈紡錘狀，表面抗原鑒定為CD44表達陽性，表明所獲細胞為MSCs；經Gs、5-aza以及Gs+5-aza誘導后，MSCs分化成類心肌細胞，3組的心肌樣細胞轉化率無顯著性差異(分別為38％、35％、39％)；免疫組化和RT-PCR檢測結果顯示特異性蛋白結蛋白和肌鈣蛋白、心肌肌球蛋白重鏈表達均陽性，陽性細胞呈梭形和成纖維細胞樣形態(tài)，表明MSCs在Gs體外誘導下已向心肌樣細胞轉化，并具有心肌樣細胞的特性。

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