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       首頁(yè) >> 中醫(yī)基礎(chǔ)常識(shí) >> 雜談
    
      

      


      
    
      
        
      脾虛模型實(shí)驗(yàn)研究方法概述
      
        
      
            醫(yī)案日記
            2023-05-16 17:24:42
        
      

        
      
           
      自1979年北京師范大學(xué)首家報(bào)道脾虛動(dòng)物模型研制以來(lái)
      ，脾虛動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究工作取得了較豐富的經(jīng)驗(yàn)
      。從最早的大黃致腹瀉模型到最近常用的多因素模型
      ，以及病證結(jié)合模型，雖然思路不同
      、方法有異
        ，但其研究方法在脾虛動(dòng)物模型的不同研究階段都起到一定的推動(dòng)作用
      ，為脾虛證的認(rèn)識(shí)積累了寶貴資料
      。1以中醫(yī)理論體系中的“證”為基礎(chǔ)而復(fù)制的病因模型動(dòng)物模型造模方法是以中醫(yī)“證”的特點(diǎn)為研究思路，理論依據(jù)為中醫(yī)文獻(xiàn)中導(dǎo)致脾虛的有關(guān)論述
      。如“飲食自倍
      ，腸胃乃傷”(《素問(wèn)·痹論》)，“味過(guò)于酸
      ，……脾氣乃絕
      ，，(《素問(wèn)·生氣通天論》)
      ，“勞則氣耗”(《素問(wèn)·舉痛論》)
      。以及“谷不入，半日則氣虛
      ，一日則氣少”
      ；李時(shí)珍對(duì)大黃“其性苦寒，能傷元?dú)夂年幯钡恼撌?div   id="4qifd00"   class="flower right">
      ；李杲：“大忌苦寒之藥損其脾胃”
      ；《景岳全書》云：“凡失饑傷飽，損及脾胃
      ，多令人胸膈痞悶
      ，不能消化
      ，飲食少思，口中無(wú)味
      ，或噯氣吞酸
      ，神體困倦，此皆脾氣受傷
      ，中虛而然
      。”以及《本草經(jīng)疏》中“脾虛忌下
      、降泄、破氣”等理論
      。造模方法從單因素發(fā)展為多因素
      ，主要有以下幾方面。1．1藥物因素造模 其中絕大多數(shù)為苦寒瀉下法
      ?div   id="d48novz"   class="flower left">
      ？嗪疄a下法中最常用的藥物為大黃、芒硝
      、番瀉葉
      、大承氣湯等。在苦寒瀉下的基礎(chǔ)上
      ，進(jìn)一步衍生了采用破氣
      、降氣的枳實(shí)、厚樸
      、檳榔等
      ，或制成煎劑灌胃，或制成藥化飼料喂養(yǎng)
      。1．1．1大黃脾虛證動(dòng)物模型 大黃脾虛模型是我國(guó)最早的脾虛模型之一
      ，應(yīng)用時(shí)間長(zhǎng)，比較普及
      ，并積累了較多的實(shí)驗(yàn)研究資料
      。其具體操作方法為：取體重18～20g小鼠，以100％大黃水煎液(1ml／只)灌胃
      ，連續(xù)8d
      ；或用大鼠每次灌胃200％大黃水浸煎劑(2．O～2．5ml)，每日2次
      ，連續(xù)10d
      ；或用大鼠每次灌胃15％大黃粉懸液(3～5ml)，每日2次
      ，連續(xù)14d
      。1．1．2番瀉葉脾虛證動(dòng)物模型Wistar大白鼠
      ，體重(220±50)g。將自來(lái)水放入燒杯中煮沸后
      ，迅速將印度產(chǎn)番瀉葉以20ml水中放入1g番瀉葉的比例投入沸水中浸泡
      ，冷卻后使用，按每日20ml／kg
      ，2次／d的量給予番瀉葉浸劑灌服
      ，連續(xù)20d。李氏等分別用大黃
      、玄明粉
      、番瀉葉、大黃加玄明粉灌胃
      ，持續(xù)30d
      ，成功地研制了脾虛泄瀉證大鼠模型，并認(rèn)為番瀉葉是復(fù)制脾虛泄瀉動(dòng)物模型的首選藥物
      。曲氏等通過(guò)對(duì)苦寒瀉下兩種脾虛模型免疫學(xué)的比較研究
      ，說(shuō)明掌葉大黃的瀉下作用較緩且因鞣質(zhì)含量較高，在產(chǎn)生瀉下作用后又可出現(xiàn)便秘
      ；而番瀉葉瀉下作用相對(duì)較強(qiáng)
      。此外，大黃還含有抗細(xì)菌
      、抗病毒
      、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫力的有效成分
      ，能使機(jī)體暫時(shí)出現(xiàn)免疫力下降的因素與之相對(duì)峙
      ；而番瀉葉獨(dú)歸大腸、專于瀉下
      、純?yōu)a無(wú)補(bǔ)
      ，從而進(jìn)一步說(shuō)明番瀉葉可作為苦寒瀉下動(dòng)物模型的首選藥物。1．1．3大承氣湯及加味大承氣湯復(fù)制脾虛動(dòng)物模型 郭氏等用大承氣湯加水先煎芒硝
      、枳實(shí)
      、厚樸，大黃后下略煎
      ，兩次煎液混合
      ，濃縮過(guò)濾，加蒸餾水配成每毫升含原藥材1g的藥液
      ；或加味大承氣湯
      ，芒硝、枳實(shí)、厚樸
      、大黃煎法同上
      ，藥液濃縮過(guò)濾；番瀉葉加開(kāi)水浸泡過(guò)濾
      ，兩液混合
      ，加蒸餾水配成每毫升含原藥材l g的藥液。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始1～4d
      ，給造模組每只小白鼠每天灌服大承氣湯藥液0．5mL
      ，5～7d每天灌服0．8ml，8～11d每天灌服加味大承氣湯藥液0．8ml
      。認(rèn)為其在復(fù)制脾虛證模型時(shí)
      ，在大承氣湯基礎(chǔ)上重用大黃，加用番瀉葉效果更為理想
      。1．1．4耗氣破氣脾氣虛大鼠模型 闞氏等將大黃
      、厚樸、枳實(shí)按1：1：1的比例浸泡于冷水中30min
      ，煮沸后再用文火煮20min，最終濃度相當(dāng)于2g／mL原藥材
      。每日2次
      ，上、下午各1次
      ；雙日喂大白菜
      ，不限量，自由進(jìn)水
      ，持續(xù)3周
      ，復(fù)制了耗氣破氣脾氣虛大鼠模型。王氏等進(jìn)行驢造脾虛模型的實(shí)驗(yàn)
      。用厚樸
      、枳實(shí)、大黃(3：3：2)的比例制成散劑
      ，按每2天1．5g／kg的劑量
      ，用800ml保溫瓶開(kāi)水浸泡10min后，冷水稀釋至溫度接近體溫
      ，隔日灌胃1次
        ，且灌胃當(dāng)日禁食，次日足量喂飼
        ，連續(xù)6周
        ，取得了理想的效果。陳氏等經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)認(rèn)為，耗氣破氣方法應(yīng)作為長(zhǎng)期脾虛造模的首選方法
        。1．2飲食因素造模1．2．1飲食偏嗜法取體重20～37g小鼠
        ，喂飼甘藍(lán)，每2天加喂豬脂1次(數(shù)量不限)
      ，連續(xù)9d
      。黃氏等用上述方法成功地研制了飲食失節(jié)動(dòng)物模型。此外
      ，羅氏等給大鼠第1日用50℃白酒2ml灌胃
      ；第2日以后每日灌胃食醋2mL，持續(xù)10d
      ，研制脾虛模型
      。后用四君子湯輔佐性證明。彭氏等先將黃連
      、苦杏仁制成100％濃度煎劑
      ，再用黃連液 O．25ml／kg和苦杏仁0．25mL／kg，每日1次灌胃
      ，持續(xù)15d
      。何氏等研制了偏食辛溫燥熱脾虛小鼠模型。每日用炒過(guò)的混合飼料喂養(yǎng)(豆餅2％
      、大米粉20％
      、米糖16％、玉米粉15％
      、大豆粉20％
      、魚(yú)粉5％、骨粉3％
      、食鹽1％)
      ，同時(shí)以新鮮辣椒作為青飼料喂養(yǎng)，并喂給青菜與清潔水
      ，持續(xù)6d
      。1．2．2饑飽失常法 饑飽失常法常作為復(fù)合因素造模的一個(gè)輔佐因素。方法是在連續(xù)禁食48h(不禁水)后
      ，給予自由飲食2h
        。自由飲食2h的進(jìn)食量相當(dāng)于正常飲食狀態(tài)下每日飲食量的75％～80％。1．3藥物或飲食因素加勞倦因素 采用隔日喂食并震蕩器震蕩(饑飽失常結(jié)合勞倦過(guò)度)
        ，喂食豬油
        、甘藍(lán)并跑步(肥甘過(guò)度結(jié)合勞倦過(guò)度)，以及用大黃
        、芒硝制成的藥化飼料喂養(yǎng)
        ，同時(shí)用震蕩器震蕩
        。勞倦方法有多種，一般有溫水游泳法
        、震蕩器震蕩法
        、跑步機(jī)跑步法等。1．3．1瀉下加勞倦過(guò)度 小鼠游泳2～5min
        ，以身體下沉為度
        ，每日1次，且施100％大黃煎劑每日0．5ml／只灌胃
        ，或施100％番瀉葉煎劑每日0．5ml／只灌胃
        。梁氏等每日喂足量大黃芒硝藥化飼料(大黃、芒硝
        、標(biāo)準(zhǔn)飼料按0．85：0．15：9．0比例均勻混合后制成藥化飼料
        ，每克飼料含原藥材0．1g)；并于每日上午8—12點(diǎn)在振蕩器(繼電器控制
        ，使其每振蕩20min
        ，停振5min)上振蕩4h，共造模3周
        。1．3．2飲食偏嗜加勞倦過(guò)度將大鼠隔日在跑步機(jī)上跑步30min
        ，單日精煉豬油6ml，每日2次灌胃
        ；雙日飼大白菜
        ，不限量，自由進(jìn)水
      ，持續(xù)3周左右
      。1．3．3饑飽失常加勞倦過(guò)度 用托盤將鼠籠固定于振蕩器上
      ，使其每振動(dòng)20min停10min
      ，根據(jù)大鼠體重的不同，振動(dòng)6～lO h
      ，每日1次
      ，共振蕩8～33d。在振蕩的同時(shí)
      ，用普通混合飼料
      ，隔日給食，給食時(shí)保證足量
      。除振蕩外
      ，其它時(shí)間自由飲水。傅氏等也用勞倦與饑飽法研制了大白鼠脾氣虛證模型
      。1．4藥物加飲食因素 多采用耗氣破氣加饑飽失常法
      。陳氏等n9]用Wistar大鼠，以厚樸、枳實(shí)
      、大黃(3：3：2)常規(guī)制成lkg幾煎劑
      ，隔日灌胃1次，每次4ml／只()或3ml／只(♀)
      ，同時(shí)隔日喂飼
      。造模時(shí)間為26周。陳氏針對(duì)脾虛模型中存在“精氣未奪
      ，
      ，的問(wèn)題，對(duì)脾虛證動(dòng)物模型的制造方法進(jìn)行了改進(jìn)
        。用體質(zhì)篩選
        、苦寒瀉下和耗氣破氣相結(jié)合的方法造模。選用：①用生大黃
        、厚樸
        、枳實(shí)(2：1：1)200％濃度煎劑。②用廣豆根
        、旋覆花
        、檳榔(3：1：1)制成250％濃度煎劑。藥化飼料按①方法制成750g／600ml煎液
        ，每600ml藥液加入6000g原飼料粉中
        。藥化飲水：旋覆花、檳榔(1：1)于60℃水浴濃縮成16．7％(50g／300ml)煎液
        。造模時(shí)先采用游泳時(shí)間法測(cè)定體質(zhì)
      ，方法是22℃水溫，游泳至連續(xù)“冒泡”5次為限
      ，記錄游泳時(shí)間
      ，短者(即體質(zhì)弱者)用于造模。給藥時(shí)用①和②
      ，藥溫為4℃
      ，交替灌胃，造模前18d
      ，3次／d
      ，后12d，4次／d
      ；同時(shí)
      ，自由喂飼藥化飼料及藥化飲水，造模時(shí)間為30d
      。脾氣虛證模型規(guī)范化的創(chuàng)新點(diǎn)在于將體質(zhì)篩選法運(yùn)用于建立證候模型
      ；在耗氣破氣法的基礎(chǔ)上
      ，將降氣法運(yùn)用于建立脾虛證模型；將廣豆根
      、檳榔
      、旋覆花等藥物運(yùn)用于建立脾虛證模型；采用“滿負(fù)荷”造模方法以求在有限時(shí)間內(nèi)使動(dòng)物達(dá)到“精氣奪”程度
      。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示
      ，自然恢復(fù)期達(dá)到78d，并超過(guò)雙倍造模時(shí)間
      。2據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)原理和方法造模 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)病理造模是以中西醫(yī)結(jié)合為手段
      ，借用西藥或西醫(yī)處理方法，對(duì)在脾虛證過(guò)程中所出現(xiàn)的一系列病理變化
      ，如：?jiǎn)伟奉惤橘|(zhì)耗竭
      、交感神經(jīng)功能偏低、副交感神經(jīng)功能偏高
      、腸運(yùn)動(dòng)增加等進(jìn)行模仿
      ，從而制造類似脾虛的癥狀。2．1利血平脾虛模型 小鼠體重20～25g
      ，以利血平O．1mg／kg皮下注射
      ，連續(xù)14d，即形成利血平化脾虛型小鼠
      ，或取大鼠
      ，肌注利血平注射液，每日0．2mg／kg
      ，連續(xù)3d
      。2．2x射線照射制脾氣虛模型 選用60日齡Wistar大鼠，體重(200±30)g
      ，單籠飼養(yǎng)
      ，按250拉德／min照射劑量進(jìn)行腹外照射，造模時(shí)間共7d
      。3病證結(jié)合模型 這類模型的特點(diǎn)是既有脾虛證的各種表現(xiàn)
      ，又有病的體征
      。其造模方法多先用耗氣破氣加饑飽失?div   id="d48novz"   class="flower left">
      ；虼簏S煎劑灌胃造成脾虛模型，再使用西醫(yī)相關(guān)疾病動(dòng)物模型的制作方法復(fù)制病證結(jié)合模型
      ，如用HP菌液灌胃
      、注射醋酸等復(fù)制大鼠幽門感染模型。病證結(jié)合模型可使中醫(yī)臨床對(duì)疾病的辨證施治有相應(yīng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)條件
      ，特別是使中醫(yī)辨證施治新藥藥理實(shí)驗(yàn)有相應(yīng)證
      、病結(jié)合模型可采用
      ；而且可克服中醫(yī)動(dòng)物模型研究虛化傾向，特別是避免中醫(yī)動(dòng)物模型難以實(shí)用的缺陷
      ；通過(guò)證病結(jié)合研究以求對(duì)疾病研究
      、證候研究取得進(jìn)展。4結(jié)語(yǔ) 由于臨床研究的諸多困難
      ，借助于動(dòng)物模型以探討脾虛證的本質(zhì)是非常必要的
      。動(dòng)物模型的應(yīng)用有助于嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件和按照預(yù)定的設(shè)計(jì)去做各種客觀的觀察及定量分析，即使對(duì)機(jī)體有害的因素也可進(jìn)行研究
      。脾虛動(dòng)物模型的造模方法經(jīng)過(guò)20多年的實(shí)驗(yàn)研究
      ，從不同角度、不同層次進(jìn)行了探討
      。雖然有些實(shí)驗(yàn)研究方法尚待進(jìn)一步發(fā)展與完善
      ，但脾虛動(dòng)物模型在不同時(shí)期促進(jìn)了脾虛證本質(zhì)研究的發(fā)展，是脾虛證研究的一個(gè)重要方面
      。摘自：《中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志》文/沈麗波
      ，錢會(huì)南
      

          
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      ？一般來(lái)說(shuō)，引起牙痛的主要原因是口腔疾病
      ，如齲齒
      、急性牙髓炎、牙周炎
      、急慢性根尖周炎
      、牙本質(zhì)過(guò)敏、牙齒隱裂或根折等
      。齲齒引起的牙痛是因?yàn)檠荔w有齲洞
 
                
            
      
                
      
                    
                        
      安全使用甲硝唑
      
                        
      近年來(lái)甲硝唑在臨床的應(yīng)用愈來(lái)愈廣泛，不僅用于滴蟲(chóng)病和阿米巴病的治療
      ，還進(jìn)一步用于慢性胃炎
      、潰瘍病的根除幽門螺桿菌治療，并且在內(nèi)外科的抗厭氧菌感染或混合感染中得到廣泛應(yīng)用
 
                
            
      
                
      
                    
                        
      基因檢測(cè)結(jié)果可能影響乳腺癌患者對(duì)手術(shù)方案的選擇
      
                        
      《中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào)》報(bào)道
      ，最近
      ，美國(guó)的研究人員提出，新近確診為乳腺癌的女性患者
 
                
            
      
                
      
                    
                        
      小兒腎炎
      
                        
      疾病概述小兒腎炎一般指腎小球腎炎
      ，是一種雙側(cè)腎臟的彌漫性、非化膿性疾病
      。多發(fā)生于學(xué)齡兒童
 
                
            
      
                
 
                
            
      
                
      
                    
                        
      更年心是怎么回事?
      
                        
      更年心是怎么回事?近20年來(lái)
        ，更年期綜合征幾乎成了醫(yī)學(xué)上一個(gè)時(shí)髦的診斷。不少45～55歲的中年婦女
        ，因心慌
        、失眠多夢(mèng)、潮熱
        、煩躁