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中藥鑒定(三)-中藥顯微鑒定

醫(yī)案日記 2023-05-09 09:57:56

中藥鑒定(三)-中藥顯微鑒定

主要是利用顯微鏡觀察藥材的內(nèi)部組織構(gòu)造

、細(xì)胞形狀及其后含物的特征
,用以鑒定藥材的真?zhèn)魏图兌?div id="m50uktp" class="box-center"> ,甚至品質(zhì)
。同時(shí),應(yīng)用顯微化學(xué)的方法還可以確定某些成分在組織中的分布
,對(duì)指導(dǎo)藥材的鑒定
、采收
、功工和貯藏都有參考價(jià)值
。對(duì)于僅通過(guò)性狀不易識(shí)別的藥材
、性狀相近的多來(lái)源藥材或切碎和粉末狀態(tài)的藥材
,以及用粉末制成的中藥成方制劑,顯微鑒定尤其重要

(1)藥材的顯微鑒定

根據(jù)觀察的對(duì)象和目的

,制作不同的切片
,如橫
、縱切片
,表面片
,解離組織片,粉制片,花粉粒與孢子制片等
,并配合各種組織
、細(xì)胞或后含物的透化劑
、染色劑
、顯色劑,可以達(dá)到對(duì)藥材的有效鑒定。如大黃的大型簇晶
,甘草的晶鞘纖維
,黃連的黃色石細(xì)胞
,人參的樹脂道
,何首烏、牛膝的異常構(gòu)造,華山參的木內(nèi)韌皮部
,貝母的淀粉粒
,麻黃的氣孔
,松花粉的花粉粒
,金銀花的毛茸等都有獨(dú)特之處;來(lái)源于四科的大青葉可通過(guò)葉表面觀的氣孔式
、毛茸
、結(jié)晶等相互區(qū)別

由于掃描電子顯微鏡的應(yīng)用

,使顯微鑒定的水平進(jìn)一步提高
,而且
,藥材不需制作切片和染色
,即可直接進(jìn)行表面或斷面的觀察
,獲得細(xì)微的三維結(jié)構(gòu)特征
。如黨參、何首烏、雞血藤的導(dǎo)管
,石斛的葉鞘
,白頭翁的葉柄基(白毛)
,紅花、金銀花
、洋金花的花粉粒等的超微結(jié)構(gòu)
,都提供了新的顯微鑒別依據(jù)

(2)中藥成方制劑的顯微鑒定

中成藥多有粉末直接入藥者

,常由數(shù)種
、十幾種及至數(shù)十種粉末藥材組成
,素有“丸
、散
、錠
、丹
,神仙難辨”之說(shuō)
。然而,通過(guò)掌握各組成藥材的組織粉末特征,完全可以對(duì)中成藥進(jìn)行顯微鑒定
。如徐國(guó)鈞等在50年代首先進(jìn)行了“南京靈應(yīng)痧藥”的顯微鑒定
,成功地檢出了麝香
、蟾酥、天麻
、麻黃
、蒼術(shù)
、甘草
、丁香
、大黃
、雄黃、朱砂等組成藥物。其他如六味地黃丸
、十全大補(bǔ)九
、海馬補(bǔ)腎丸
、石斛夜光丸的鑒定
,特別是《中華人民共和國(guó)藥典》(1995年版)收載的最大復(fù)方“再造丸”,共由58味植、動(dòng)
、礦物藥組成
,能夠逐一檢出對(duì)應(yīng)于每一組成藥材的細(xì)胞組織特征
。顯微鑒定對(duì)于中成藥的鑒定
,至今仍不失為行之有效的方法

中草藥及成方制劑顯微鑒別法介紹

顯微鑒別系指用顯微鏡對(duì)藥材的切片

、粉末
、解離組織或表面制片及成方制劑中藥味的組織
、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征進(jìn)行鑒別的一種方法。

鑒別時(shí)選擇有代表性的樣品
,根據(jù)各該藥材鑒別項(xiàng)的規(guī)定制片。成方制劑根據(jù)不同劑型適當(dāng)處理后制片


、橫切片或縱切片:選取藥材適當(dāng)部位,軟化后用徒手或滑走切片法
,切成10~20μm的薄片
,選用甘油醋酸試液
、水合氯醛試液或其它試液處理后觀察。必要時(shí)可包埋后切片
。[醫(yī) 學(xué)教育網(wǎng) 搜集 整理]

、粉末制片:取粉末少量
,置載玻片上
,攤平,選用甘油醋酸試液
、水合氯醛試液或其它適當(dāng)試液處理后觀察。

、表面制片:將樣品濕潤(rùn)軟化后,切取一部分或撕取其表皮
,加適宜的試液觀察


、解離組織片:如樣品中薄壁組織占大部分
,木化組織少或分散存在,可用氫氧化鉀法
;如果品堅(jiān)硬,木化組織較多或集成較大群束
,可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。在解離前
,應(yīng)先將樣品切成寬或厚約2mm的小條或片


1.氫氧化鉀法

置樣品于試管中
,加5%氫氧化鉀溶液適量
,加熱至用玻璃棒擠壓能離散為止
,傾去堿液
,加水洗滌后
,取出少量置載玻片上
,用解剖針?biāo)洪_
,以稀甘油裝置觀察。

2.硝鉻酸法

置樣品于試管中
,加硝鉻酸試液適量,放置
,至用玻璃棒擠壓能離散為止
,傾去酸液
,加水洗滌后
,照1.法操作裝置


3.氯酸鉀法

置樣品于試管中
,加硝酸溶液(1→2)及氯酸鉀少量,緩緩加熱,待產(chǎn)生的氣泡漸少時(shí)
,再及時(shí)加入氯酸鉀少量
,以維持氣泡穩(wěn)定地發(fā)生
,至用玻璃棒擠壓能離散為止
,傾去酸液,加水洗滌后
,照1.法操作裝置。

、花粉粒與孢子制片:取花粉
、花藥(或小的花朵)或孢子囊群(干燥樣品浸于冰醋酸中軟化)
,用玻璃棒搗碎
,過(guò)濾于離心管中
,離心
,取沉淀加新鮮配制的醋酐與硫酸(9∶1)的混合液1~3ml
,置水浴上加熱2~3分鐘
,離心
,取沉淀,用水洗滌2次
,加50%甘油與1%苯酚3~4滴,用品紅甘油膠封藏觀察
。也可用水合氯醛試液裝置觀察。[醫(yī)學(xué)教育網(wǎng) 搜集 整理]

、細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等的測(cè)量:在顯微鏡下測(cè)量細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等的大小
,可用目鏡測(cè)微尺測(cè)量
。先將目鏡測(cè)微尺裝入目鏡內(nèi)
,用鏡臺(tái)測(cè)微尺標(biāo)化。標(biāo)化時(shí)
,轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡,移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺
,使兩種量尺的刻度平行,左邊的“0” 刻度重合
,再找第二條重合刻度
。根據(jù)兩條重合刻度間兩種量尺的小格數(shù),計(jì)算出目鏡測(cè)微尺每小格在該物鏡條件下所相當(dāng)?shù)拇笮
。é蘭)。測(cè)量時(shí)
,以目鏡測(cè)微尺測(cè)量目的物的小格數(shù),乘以每一小格的大?div id="jfovm50" class="index-wrap">。é蘭)
。通常是在高倍物鏡下進(jìn)行
,但欲測(cè)量較長(zhǎng)的如纖維
、非腺毛等的長(zhǎng)度時(shí),則以在低倍物鏡下測(cè)量較為方便
。記錄值與最小值(μm)
,可允許有少量略高或略低于藥典規(guī)定的數(shù)值。

、細(xì)胞壁性質(zhì)的檢定:

1.木質(zhì)化細(xì)胞壁

加間苯三酚試液1~2滴,稍放置
,加鹽酸1滴
,因木化程度不同
,顯紅色或紫紅色


2.木栓化或角質(zhì)化細(xì)胞壁

加蘇丹Ⅲ試液,稍放置或微熱
,顯橘紅色至紅色。

3.纖維素細(xì)胞壁

加氯化鋅碘試液
;或先加碘試液濕潤(rùn)后,稍放置
,再加硫酸溶液(33→50)
;顯藍(lán)色或紫色。

4.硅質(zhì)化細(xì)胞壁

加硫酸無(wú)變化


八、細(xì)胞內(nèi)含物性質(zhì)的檢定:

1.淀粉粒

(1)加碘試液
,顯藍(lán)色或紫色。

(2)用甘油醋酸試液裝置
,置偏光顯微鏡下觀察,未糊化的淀粉粒顯偏光現(xiàn)象
;已糊化的無(wú)偏光現(xiàn)象。

請(qǐng)問(wèn)中藥主要有哪幾種鑒定方法

中藥材的鑒別方法有很多

,通?div id="jfovm50" class="index-wrap">?煞譃閷?duì)植物自然形態(tài)的鑒別,對(duì)炮制藥材外表性狀的鑒別
,用顯微鏡觀察微觀結(jié)構(gòu)的鑒別
,以及化學(xué)分析、生物測(cè)定等鑒別方法
。其中最主要、也是最常用的
,還是中藥材的經(jīng)驗(yàn)鑒別法
,也就是對(duì)藥材的外觀性狀的鑒別

以下幾種常用而簡(jiǎn)單的鑒別方法:?
、看外觀,注意觀察藥材的外表特征
,如表皮、顏色
、形狀、粗細(xì)
、斷面等等

1、看藥材的表面
。不同種類的藥材由于用藥部位的不同,其外形特征會(huì)有所差異
。如根類藥材多為圓柱形或紡錘形
,而根莖類藥材都有較多的莖痕,皮類藥材則多為卷筒狀
,等等。另外
,一些藥材有著它們自己特定的表面特征
,或光華、或粗糙
、或長(zhǎng)有鱗葉、皮孔
、茸毛和突起等
。比如海馬的外形就被總結(jié)成為“馬頭蛇尾瓦楞身”,羚羊角長(zhǎng)有“通天眼”,防風(fēng)長(zhǎng)有“蚯蚓頭”等
。這些特征都是鑒別道地藥材真?zhèn)蝺?yōu)劣的重要依據(jù)。
2
、看顏色
。藥材顏色的不同或變化
,不僅與它的品種和本身的質(zhì)量有關(guān)
,不適當(dāng)?shù)募庸ず蛢?chǔ)藏方法也會(huì)直接影響藥材的色澤,因此顏色是鑒別藥材的重要因素
。我們可以通過(guò)對(duì)藥材外表顏色的觀察,分辨出藥材的品種
、產(chǎn)地和質(zhì)量的好壞
。比如,黃連色要黃
,丹參色要紅,玄參色偏黑等

3
、看斷面
。無(wú)論植物也好
,動(dòng)物也好
,都是由一層層的組織器官構(gòu)造而成的
,當(dāng)藥材被切開,這一層層的構(gòu)造就會(huì)清晰地展現(xiàn)出來(lái)
,就像古樹的年輪一樣。很多藥材的斷面都具有明顯的特征
,而這些特征就是藥材內(nèi)部構(gòu)造的直接體現(xiàn)
。我們可以清楚的看見(jiàn)各種分層
、紋路和不同形狀的小點(diǎn)。比如在防己斷面上能看見(jiàn)明顯的車輪紋理
,而黃芪的折斷面紋理呈“菊花心”樣,杜仲在折斷時(shí)更有膠狀的細(xì)絲相連,等等
。這些獨(dú)有的斷面特征是鑒別藥材的重要依據(jù)

用手感受藥材的軟硬
、輕重
,疏松還是致密,光滑還是粘膩
,細(xì)致還是粗糙,以此鑒別藥材的好壞
。不同藥材的質(zhì)感是不一樣的
,即使是同一種藥材
,由于加工炮制的方法不同
,也會(huì)有較大的差異。如荊三棱堅(jiān)實(shí)體重
,而泡三棱則體輕;鹽附子質(zhì)軟
,而黑附子則質(zhì)地堅(jiān)硬

、口嘗和鼻聞

藥材的氣味與其所含的成分有關(guān),鼻聞是比較重要的鑒別方法
,尤其對(duì)于鑒別一些有濃郁氣味的藥材是很有效的,如薄荷的香
、魚腥草的腥
、阿魏的臭等等?div id="m50uktp" class="box-center"> ?趪L法鑒別藥材的意義不僅在于味道還包括“味感”
,味分為辛
、甘
、酸、苦
、咸五味
,如山楂的酸
、黃連的苦
、甘草的甜等。味感則分為麻
、澀、淡
、滑
、涼、膩等
。藥材的味感和所含的化學(xué)物質(zhì)也有密切關(guān)系
,在中藥材口嘗鑒別的實(shí)踐中,可按藥材的品種和質(zhì)量分類進(jìn)行判斷

四、水試和火試

有些藥材放在水中
,或用火燒灼一下會(huì)產(chǎn)生特殊的現(xiàn)象。如熊膽的粉末放在水中
,會(huì)先在水面上旋轉(zhuǎn),然后成黃線下沉而不會(huì)擴(kuò)散
。麝香被燒灼時(shí)
,會(huì)產(chǎn)生濃郁的香氣
,燃盡后留下白色的灰末
。這些特殊的現(xiàn)象都與藥材內(nèi)所含的化學(xué)成分有密切的關(guān)系,是常用的鑒別方法
。?

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